lunes, 16 de junio de 2008

analisis de semen


UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO BOLÍVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
Departamento de Bioanálisis
Bioquímica Clínica




Analisis Del semen











Bachiller:
perez leidys
profesor:

German guzmán





CIUDAD BOLÍVAR, JUNIO 2008

INTRODUUCION


El estudio del líquido seminal, desde el punto de vista bioquímico, es una determinación analítico-clínica de gran importancia en los estudios de infertilidad en el hombre.

Un análisis seminal completo nos informa sobre las propiedades del semen, tanto de la producción de espermatozoides como de la función de las glándulas sexuales accesorias.

Para llegar a conclusiones se recomienda realizar al menos dos análisis seminales, con no menos de quince días ni más de noventa días de separación entre ambas. Si los resultados de los dos análisis son diferentes debe repetirse un tercer examen antes de hacer conclusiones.


Los estudios que se realizan al semen con el propósito de diagnosticar la presencia de algún problema de fertilidad son los siguientes:

v Espermatograma
v Espermocultivo
v Recuperación de espermatozoides motiles
v Prueba de la viabilidad
v Prueba de la integridad del acrosoma
v Determinación de anticuerpos antiespermaticos


CONTENIDO

Condiciones que debe tener el paciente para la realización de un esperrmograma son las siguientes:

Tener de 3 a 5 días de abstinencia sexual :
Ideal: 3 dias
Minimo.2 dias
Maximo: 6 dias
Tener de 3 a 5 dias de abtinencia alcoholica
No tener fiebre, gripe, ni ningún proceso viral o bacteriano.
Tomar la muestra por masturbación en un colector estéril.
Entregar la muestra en el laboratorio en un periodo no mayor a 1 hora de haber sido tomada la muestra.
Antes de tomar la muestra debe lavarse y secarse los genitales y las manos.
Si la muestra es solo para esperrmograma, el paciente debe orinar completamente.
Manejar la muestra con precaución, recordando que se puede transmitir a partir de ella, el VIH .HEPATITIS B. VIRUS HERPES.

El semen se considera que es normal cuando tiene:

Más de 20 millones de espermatozoides en un centímetro cúbico.
Mas de 50 % de espermatozoides móviles y por lo menos 30% de traslativos rápidos.
Mas de 30% de espermatozoides con forma y tamaño normal.

El semen se considera anormal cuando tiene:

Ausencia de espermatozoides: Azoospermia
Disminución del número de espermatozoides: Oligozoospermia
Disminución de la movilidad: Astenozoospermia
Alteración de la morfología: Teratozoospermia
Alteración de los tres parámetros: Oligoastenoteratozoospermia

Valores de referencia según la OMS:
pH:……………………………………………... .7,2 a 7,8
Volumen………………………………………... 2 ml o mas
Concentracion de espermatozoides..................... 20x106 espermatozoides/ml o mas
Total de eyaculado................................................ 40x106 espermatozoides/ml o mas
Motilidad............................................................... 50% o mas con progresion lineal (categoria a+b) o 25% o mas con progresion lineal rapida ( categoria a )
Morfologia..............................................................30% o mas con morfologia normal.
Viabilidad...............................................................75% vivos o mas ( no se colorean )
Leucocitos...............................................................menos de 1x106/ ml
Zinc..........................................................................2,4 μmol o mas por eyaculado
ά – glucosidasa neutral..........................................2,0 mU o mas por eyaculado
Acido citrico total......................................................52 μmol o mas por eyaculado
Fosfatasas acidas total................................................200 mU o mas por eyaculado
Fuctosa total...............................................................13 μmol o mas por eyaculado

Hora de toma de muestra: 9:55 am
Nombre del paciente: anónimo.

EXAMEN MACROSCOPICO

v ASPECTO: homogeneo
v LICUEFACCION: liquido a los 25 min.
v VOLUMEN: 5 ml
v COLOR: blanco amarillento
v pH : 8
v CONSISTENCIA: más de 2 cm.








EXAMEN MICROSCOPICO

v MOTILIDAD

TECNICA: se agrega una pequeña cantidad de semen (menos de 10 μL) en un portaobjeto y se procede a cubrirlo con un cubreobjeto, luego se deja estabilizar la muestra por 1 min. Antes de ser estudiada.


a-motilidad progresiva rápida………….27%
b- motilidad progresiva lenta…………..15%
c- motilidad no progresiva…………….48%
d- inmóvil………………………………20%

Resultado: de acuerdo a los valores de referencia de la OMS son de tipo A

v RECUENTO DE LOS ESPERMATOZOIDES

TECNICA: se preparo una dilución 1/10, es decir, 1 ml de muestra y 9 ml de la solución diluyente. Luego con la muestra diluida se lleno el hematimetro y se dejo reposar por 5 min. Luego se contaron los espermatozoides completos con el objetivo de 100x.
El recuento se realizo en el cuadrado central del hematimetro, se contaron los cuadrados centrales y determinamos el promedio.

Promedio del recuento de espermatozoides: 124

Promedio del recuento de espermatozoides
Concentración de espermatozoides: -----------------------------------------------------------

Factor de corrección

NOTA: el factor corrección va a depender de la dilución realizada a la muestra y del número de cuadrados grandes del cuadrante central del hematimetro que fueron contados.

Factor de corrección: 10
124
Concertación de espermatozoides: ------------------:12,4x106 espermatozoides/ ml

10


Total del eyaculado: concentración de espermatozoide x Vol. total de la eyaculacion (ml)


Total del eyaculado: 12,4x106espermatozoidesx 5 ml: 62x106espermatozoides/ml.

v MORFOLOGIA


TECNICA: se utilizan en su mayoría extendidos teñidos con diferentes métodos. Dentro de ellos tenemos Giemsa, la técnica de Papanicolaou modificada, la tinción de Bryan-leishman o la tinción de shorr.



RESULTADOS: 50 % con morfología normal.


v VIABILIDAD:

TECNICA: TINCION CON EOSINA:
1. Mézclese una gota de semen fresco con una gota de solución de eosina al 5% en un portaobjeto y cúbrase con el cubreobjeto.

2. Al cabo de 1 o 2 minutos obsérvese el preparado con 40x con luz intensa o con contraste de fase.

3. Cuéntense los espermatozoides vivos y muertos.


RESULTADOS: 90 % vivos



BIBLIOGRAFIA

Ángel, G. Ángel, M. Interpretación Clínica del Laboratorio. Transaminasas. Bogota – Colombia. 2006

lunes, 9 de junio de 2008

evaluacion de la funcion osea



UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO BOLÍVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
Departamento de Bioanálisis
Bioquímica Clínica




Evaluación de la función ósea




Facilitador: Bachiller:
Lcdo. Germán guzmán Pérez leidys
Gonzales Nairobis






CIUDAD BOLÍVAR, MAYO 2008


introduccion



El hueso es un órgano firme, duro y resistente que forma parte de los vertebrados. Esta compuesto por una matriz ósea que contiene colágeno I y proteínas, una matriz mineral que contiene calcio y fosforo, y una matriz celular en donde podemos encontrar los osteoclasto y osteoblastos.


fósforo

Es un elemento esencial del hueso y de todos los tejidos e intervienen, de alguna forma, en casi todos los procesos metabólicos. la cantidad total del fosforo en un adulto normal es aproximadamente de 32mol(1 Kg), del cual el 85% se localiza en el hueso y el 15% en el plasma.

Fundamento

Los iones de fosfato reaccionan con el molibdeno en un medio acido, formando un complejo amarillo, que por acción de un tapóm alcalino, es reducido a azul de molibdeno que es medido colorimétricamente

Material requerido:

Espectrofotómetro
Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
Cronometro

Técnica

Paciente: 1 ml de reactivo + 20 landas de muestra

Patrón: 1 ml de reactivo + 20 landas de muestra

Blanco: 1 ml de reactivo.

1- Mesclar bien.
2- Incubar 5 min a temperatura ambiente
3- Leer a 340 nm.

El aparato que se encuentra en el laboratorio de Bioquímica clínica es semiautomático y nos dio los resultados directamente en mg/dl.

Lectura en mg/dl: 6.30

VR: 2,5-4,8 mg/dl.

Bibliografía


Ángel, G. Ángel, M. Interpretación Clínica del Laboratorio. Transaminasas. Bogota – Colombia. 2006
Anderson , S .y cockaine, S.(1995).QUIMICA CLINICA .interamericana McGraw-hill:mexico

martes, 3 de junio de 2008


Universidad de Oriente
Núcleo Bolívar
Escuela de Ciencias de la Salud “Francisco Battistini Casalta”
Cátedra: Bioquímica Clínica.






perfil hepatico










Profesor:
Germán Guzmán

Alumnas:
González Nairobys
Pérez Leidy








Ciudad Bolívar, 26 de Mayo del 2008




INDICE
Pag.
INTRODUCCIÓN 3

CONTENIDO 4

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 7




INTRODUCCION

Las Transaminasas son enzimas representadas por proteínas simples, conjugadas y sintetizadas por células de diferentes tejidos: hepático, renal, nervioso, miocardio y músculo estriado. Las cantidades de estas enzimas que pasan a la sangre son tan pequeñas que no permiten la evaluación cuantitativa en miligramos o en mili equivalentes, por lo que se presentan en unidades internacionales (IU). (1)

El resultado de la acción de las enzimas sobre substratos especiales genera como producto, aminoácidos como alanina, glutamato o aspartato, originando dos transaminasas de gran importancia en el Laboratorio, como son la Glutámico-oxalacetica(SGOT) también llamada aspartato aminotransferasa (AST) y la glutámico piruvicotransaminasa (SGPT) o alanino aminotranferasa (ALT). En el suero abunda más AST que la ALT. (1)

En el hepatocito la ALT se encuentra solo en el citoplasma y la AST se encuentra tanto en citoplasma como en las mitocondrias, los que les origina gran diferencia en especificidad e intensidad de reacción a los procesos patológicos. (1)

La ALT se identifica en todo proceso inflamatorio necrotico del hígado y es muy empleada prueba determinadota en personas que donan sangre, para descartar Hepatitis viral activa. Es una enzima citoplasmática del hepatocito, que se libera fácilmente cuando existe alteración celular, se manifiesta con ictericia y se puede elevar muy poco en el infarto al miocardio e intensamente si predomina la éxtasis hepática por insuficiencia cardiaca. (1)

La AST Es una enzima que se encuentra tanto en el citoplasma del hepatocito como en las mitocondrias por lo que es binocular. Esta presente en la epidermis de la piel, miocardio, músculo estriado, páncreas y riñón. Los Glóbulos rojos contienen unas 10 veces más AST que el suero. Agentes como el etanol que inducen la necrosis de las mitocondrias celulares, liberan la AST lo mismo que la hepatitis viral. Es muy útil para medir la actividad hepática y cronicidad de hepatitis viral, se eleva en infarto al miocardio, al igual que en la mononucleosis, obstrucción biliar, cirrosis, metástasis hepática, pancreatitis aguda, anemia hemolítica e infección renal. (1)



CONTENIDO

Determinación de ALT o GPT.

Fundamento del método

Basado en el siguiente esquema reaccionante:

L- alanina + 2-oxoglutarato GPT piruvato + L- glutamato

Piruvato + NADH + H* LDH L- lactato + NAD*

Reactivos provistos

Buffer: solución buffer TRIS pH 7.5 (30ºC) conteniendo L – alanina
Sustrato: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nicotamida adenina dinucleotido (NADH) y lactato deshidrogenasa (LDH).

Instrucciones para su uso:
El buffer esta listo para usar
El sustrato: agregar 2 ml de buffer a un frasco de sustrato. Tapar, agitar hasta disolución completa y fechar.
La muestra debe ser tomada de forma usual

Material requerido:

Espectrofotómetro, Fc 1740
Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
Baño de agua a la temperatura indicada en el procedimiento a seguir
Cronometro

Procedimiento:

Microtécnica

En una cubeta mantenida a 37 ºC, colocar:

Sustrato reconstituido 1 ml
Muestra 100 ul

Mezclar inmediatamente y dispara inmediatamente el cronometro y leer al minuto luego 2, 3 y 4 min.

El aparato que se encuentra en el laboratorio de Bioquímica clínica es semiautomático y nos dio los resultados, sin tener que hacer nosotros los cálculos como sacar la media absorbancia ni delta A. nuestro resultado fue: 6.21 UI/L ( 37°c)
Los Valores de referencia son:
En hombres: de 0 – 49 UI/L
En mujeres: de 0 – 31 UI/L


Determinación de AST o GOT.

Fundamento del método

Basado en el siguiente esquema reaccionante:

L- aspartato + 2-oxoglutarato GOT oxalacetato + L- glutamato

Oxalacetato + NADH + H* MDH L- malato + NAD*

Reactivos provistos

Buffer: solución buffer TRIS pH 7.8 (30ºC) conteniendo L – aspartato
Sustrato: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nicotamida adenina dinucleotido (NADH) y malato deshidrogenasa (MDH) y lactato deshidrogenasa (LDH).

Instrucciones para su uso:
El buffer esta listo para usar
El sustrato: agregar 2 ml de buffer a un frasco de sustrato. Tapar, agitar hasta disolución completa y fechar.
La muestra debe ser tomada de forma usual

Material requerido:

Espectrofotómetro, Fc 1740
Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
Baño de agua a la temperatura indicada en el procedimiento a seguir
Cronometro

Procedimiento:

Microtécnica

En una cubeta mantenida a 37 ºC, colocar:

Sustrato reconstituido 1 ml
Muestra 100 ul

Mezclar inmediatamente y dispara inmediatamente el cronometro y leer al minuto luego 2, 3 y 4 min.

El aparato que se encuentra en el laboratorio de Bioquímica clínica es semiautomático y nos dio los resultados, sin tener que hacer nosotros los cálculos como sacar la media absorbancia ni delta A. nuestro resultado fue: 19.76UI/L ( 37°c)

Los Valores de referencia son:
En hombres: de 0 – 38 UI/L
En mujeres: de 0 – 31 UI/L


BIBLIOGRAFIA

Ángel, G. Ángel, M. Interpretación Clínica del Laboratorio. Transaminasas. Bogota – Colombia. 2006